菌落計(jì)數(shù)的操作流程
更新時(shí)間：2022-08-09 | 點(diǎn)擊率：2481
菌落計(jì)數(shù)器可減輕實(shí)驗(yàn)人員的勞動(dòng)強(qiáng)度，提高工效，提高工作質(zhì)量，廣泛用于食品、飲料、藥品、生物制品、化妝品、衛(wèi)生用品、飲用水、生活污水、工業(yè)廢水、臨床標(biāo)本中細(xì)菌數(shù)的檢驗(yàn)。是各級(jí)隆重防疫站、環(huán)境監(jiān)測(cè)站、食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)所、醫(yī)院、生物制品所、藥檢所、商檢局、食品廠、飲料廠、化妝品廠、日化廠及大專院校、科研單位實(shí)驗(yàn)室的儀器。
菌落計(jì)數(shù)的操作流程
樣品的稀釋
固體和半固體樣品
稱取25 g置盛有225 mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi)，8000 r/min～10000 r/min均質(zhì)1min～2 min，或放入盛有225 mL稀釋液的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1min～2 min，制成1:10的樣品勻液。
液體樣品
以無菌吸管吸取25mL樣品置盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌錐形瓶(瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠)中，充分混勻，制成1:10的樣品勻液。
上步完成后，用1mL無菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1mL，沿管壁緩慢注于盛有9mL稀釋液的無菌試管中(注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面)，振搖試管或換用1支無菌吸管反復(fù)吹打使其混合均勻，制成1:100的樣品勻液。
培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
樣品稀釋完成后，就要進(jìn)行培養(yǎng)和菌落計(jì)數(shù)了
待瓊脂凝固后，將平板翻轉(zhuǎn)，36℃±1℃培養(yǎng)48h±2h。水產(chǎn)品30℃±1℃培養(yǎng)72h±3h。
如果樣品中可能含有在瓊脂培養(yǎng)基表面彌漫生長(zhǎng)的菌落時(shí)，可在凝固后的瓊脂表面覆蓋一薄層瓊脂培養(yǎng)基 (約4mL)，凝固后翻轉(zhuǎn)平板，按相同條件進(jìn)行培養(yǎng)。
培養(yǎng)完成后，就要進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)了，計(jì)數(shù)可用肉眼觀察，必要時(shí)用放大鏡或菌落計(jì)數(shù)器，記錄稀釋倍數(shù)和相應(yīng)的菌落數(shù)量。菌落計(jì)數(shù)以菌落形成單位表示。
大片菌落
其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長(zhǎng)時(shí)，則不宜采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長(zhǎng)的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)；若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計(jì)算半個(gè)平板后乘以2，代表一個(gè)平板菌落數(shù)。
鏈狀生長(zhǎng)
當(dāng)平板上出現(xiàn)菌落間無明
顯界線的鏈狀生長(zhǎng)時(shí)，則將每條單鏈作為一個(gè)菌落計(jì)數(shù)。
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